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凝膠成像鋅染色原理

生活經驗


凝膠成像鋅染色原理

文章插圖
1、凝膠電泳：首先，待分析的蛋白質樣品經過SDS-PAGE凝膠電泳分離 。SDS-PAGE通過在蛋白質樣品中加入類似于十六烷基硫酸鈉（SDS）的表面活性劑，使蛋白質帶有負電荷，并通過電場作用分離成不同大小的帶狀物 。
2、轉移：凝膠電泳完成后，蛋白質通過電泳轉移到含有鋅離子的轉移緩沖液中 ， 這個步驟稱為電泳轉移 。
3、鋅染色：在轉移緩沖液中加入適量的亞硫酸和硫代硫酸鈉，這兩種試劑會與鋅離子形成由蛋白質分子鐵氰化合物組成的沉淀，這稱為鋅染色 。這個沉淀表現為紫藍色 。
【凝膠成像鋅染色原理】4、可視化：經鋅染色處理后 ， 可以直接觀察到電泳凝膠上的蛋白質帶狀區域（通常出現紫藍色的帶狀區域），這些區域對應著各個分子量的蛋白質 。